La transcriptasa inversa (RT) Thermo Scientific Maxima se obtuvo a través de la evolución in vitro de la transcriptasa inversa M-MuLV.La enzima posee una actividad polimerasa dependiente de ARN y ADN, así como actividad ARNasa H.La enzima modificada mediante ingeniería genética ofrece una termoestabilidad y una resistencia considerablemente mejoradas, así como mayores tasas de síntesis en comparación con la transcriptasa inversa (RT) M-MuLV natural.

Maxima Reverse Transcriptase es capaz de hacer una síntesis reproducible del ADNc a partir de una amplia variedad de cantidades de entrada de ARN total (de 1 pg a 5 µg) a temperaturas elevadas (entre 50 y 65 °C), lo que hace que esta enzima sea una herramienta ideal para la RT-qPCR en dos pasos (consulte los materiales de referencia).

Gracias a su alta termoestabilidad, la enzima Maxima mantiene su actividad completa durante toda la reacción de transcripción inversa, genera los rendimientos más altos de ADNc y es capaz de sintetizar transcripciones de ARN muy largas, incluso de hasta 20 kb.La temperatura de reacción se puede aumentar hasta los 65 °C para una transcripción eficiente de las regiones de ARN con una elevada estructura secundaria o para mejorar la especificidad mediante cebadores específicos del gen.Gracias a su elevada tasa de síntesis, la reacción de la transcriptasa inversa se puede completar en 15-30 minutos.

Aspectos destacados

• Alta producción de ADNc de longitud completa de hasta 20 kb
• Activa hasta a 65 °C
• Termoestable: activa al 90 % tras incubación a 50 °C durante 60 minutos
• Alta sensibilidad: síntesis reproducible de ADNc a partir de una amplia gama de cantidades totales de ARN (de 1 pg a 5 µg)
• Eficiente: síntesis del ADNc completa en un periodo de entre 15 y 30 minutos
• Incorpora nucleótidos modificados

Aplicaciones

• RT-PCR en dos pasos
• RT-qPCR en dos pasos
• Síntesis de la primera cadena del ADNc
• Construcción de bibliotecas de ADNc completo
• Etiquetado de ADN
• Extensión de cebadores