La transcriptasa inversa (RT) Thermo Scientific Maxima se obtuvo a través de la evolución in vitro de la transcriptasa inversa M-MuLV. La enzima posee una actividad polimerasa dependiente de ARN y de ADN, así como actividad ARNasa H. La enzima modificada mediante ingeniería genética ofrece una termoestabilidad considerablemente mejorada, resistencia, así como mejores tasas de síntesis en comparación con la transcriptasa inversa M-MuLV natural.
Maxima Reverse Transcriptase es capaz de hacer una síntesis reproducible del ADNc a partir de una amplia variedad de cantidades de entrada de ARN total (de 1 pg a 5 µg) a temperaturas elevadas (entre 50 y 65 °C), lo que hace que esta enzima sea una herramienta ideal para RT-qPCR de dos pasos (ver datos de apoyo).
Gracias a su alta termoestabilidad, la enzima Maxima mantiene la actividad completa durante toda la reacción de transcripción inversa, genera los rendimientos más altos de ADNc, y es capaz de sintetizar incluso transcripciones de ARN muy largas de hasta 20 kb. La temperatura de reacción se puede aumentar hasta los 65 °C para una transcripción eficiente de las regiones de ARN con una elevada estructura secundaria o para mejorar la especificidad mediante primer específicos del gen. Gracias a su elevada tasa de síntesis, la reacción de la transcriptasa inversa se puede completar en 15-30 minutos.
Aspectos destacados
• Alta producción de ADNc de longitud completa de hasta 20 kb
• Activa hasta a 65 °C
• Termoestable: activa al 90 % después de la incubación a 50 °C durante 60 minutos
• Alta sensibilidad: síntesis reproducible de iADNc a partir de una amplia gama de cantidades totales de ARN (de 1 pg a 5 µg)
• Eficiente: síntesis del ADNc completa en un periodo de entre 15 y 30 minutos
• Incorpora nucleótidos modificados
Aplicaciones
• RT-PCR de dos pasos
• RT-qPCR de dos pasos
• Síntesis de la primera cadena del ADNc
• Construcción de bibliotecas de ADNc completo
• Etiquetado de ADN
• Extensión de primers
También disponible: Kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCRFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Maxima Reverse Transcriptase (200 U/µL) 2000unidades
Temperatura óptima de reacción 50-55 ° C
Línea de productos Maxima
Transcriptasa inversa Maxima
Actividad de la ribonucleasa H Sí
Cantidad 2000 unit
Size (Final Product) 20 kb o menos
Contenido y almacenamiento
La transcriptasa inversa Maxima (proporcionada como 2000 unidades a una concentración de 200 U/µl) se suministra con tampón RT 5X (250 mM de Tris-HCl [pH 8,3 a 25 °C], 375 mM de KCl, 15 mM de MgCl2, 50 mM de DTT).
Almacenar a - 20 °C.