200 reactions
 
El kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Thermo Scientific Maxima para RT-qPCR con dsDNase es un práctico sistema optimizado para la síntesis de ADNc en aplicaciones de RT-PCR cuantitativo (RT-qPCR) de dos pasos. Permite un flujo de trabajo mucho más simple, pues combina la eliminación de ADN genómico y la síntesis de ADNc en un procedimiento de un tubo. El kit contiene una nueva desoxirribonucleasa (ADNasa) específica bicatenaria diseñada para eliminar el ADN genómico contaminante de las preparaciones de ARN en cuestión de 2 minutos sin dañar la calidad o la cantidad de ARN. La actividad altamente específica hacia el ADN bicatenario garantiza que el ADN monocatenario (como el ADNc y los cebadores) no se hebra y el ARN tratado con ADNasa se puede añadir directamente a la transcripción inversa.

Para la síntesis de la primera cadena de ADNc, el kit utiliza la transcriptasa inversa Maxima, una enzima avanzada que se obtiene mediante la evolución in vitro de la transcriptasa inversa M-MuLV RT. La enzima ofrece una termoestabilidad elevada, resistencia y una mejor tasa de síntesis de ADNc en comparación con la transcriptasa inversa M-MuLV natural. El kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Maxima para RT-qPCR es capaz de realizar la síntesis reproducible de ADNc a partir de una amplia variedad de cantidades de ARN total (de 1 pg a 5 µg) a temperaturas elevadas (de 42 a 65 °C). La reacción de síntesis se puede completar en un periodo de 15 a 30 minutos. Los componentes del kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Maxima para RT-qPCR vienen premezclados para ahorrar tiempo y reducir la posibilidad de errores de pipeteo.

Aspectos destacados

• Paso de eliminación de ADNg integrado
• Alto rendimiento de ADNc de longitud completa hasta 20 kb.
• Síntesis eficaz de ADNc en un amplio intervalo de temperatura, de 42°C a 65°C.
• Mayor velocidad de síntesis: complete la síntesis de ADNc en un periodo de 15 a 30 minutos.
• Sensibilidad y especificidad elevadas.

Aplicaciones

• RT-PCR de dos pasos
• RT-qPCR de dos pasos

El kit de síntesis de la primera cadena de ADNc Maxima con ADNasa bc contiene
• Mezcla de enzima Maxima
• Mezcla de reacción 5X
• ADNasa bc
• Tampón de ADNasa bc 10X
• Agua libre de nucleasas

Información adicional sobre los componentes de reacción
La mezcla de enzimas Maxima contiene transcriptasa inversa Maxima e inhibidor de ARNasa Thermo Scientific RiboLock,. El inhibidor recombinante de la ARNasa RiboLock protege de forma eficaz las plantillas de ARN de la degradación producida por las ARNasas A, B y C a temperaturas de hasta 55°C.

La mezcla de reacción 5X contiene el resto de componentes reactivos: tampón de reacción, dNTP, oligo(dT)18 y primers hexaméricos aleatorios.

El gua libre de nucleasas se suministra para preparar la reacción y diluir el ARN de las muestras. La ausencia de endo y exodesoxirribonucleasas, ribonucleasas y fosfatasas se ha confirmado mediante las pruebas de calidad oportunas.